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PCR檢測試劑盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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節片(piàn)代凡縧蟲PCR檢測試劑(jì)盒 |
Davainea proglottinaPCR |
YS-P014086 |
分類:PCR檢測試(shì)劑盒
儲存條件(jiàn):-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún),避免反復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫(wēn),避光。
有效期(qī):一年
貨期:現貨PCR試劑盒的有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年(nián),這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià),產物檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融(róng)。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好超(chāo)過(guò)正常陰性質控品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質控品的檢測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期,Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35;
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足,否則該次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣本;對(duì)於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次(cì),若復核結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴增(zēng)期,則判定為(wéi)陽性,否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性:無指數擴增期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn),試劑汙染,樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出(chū)現假陽性結果(guǒ);
2. 試劑運輸,保存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下降,可(kě)能會(huì)導致出(chū)現假陰性結果。
②鹼基配對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性;
④靶基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
節片代凡(fán)縧蟲PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物與模(mó)板的(dí)正確結合是關鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)的。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性,使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與引物的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行,結合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā),被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的正確度。再通過選擇(zé)特異(yì)性和保守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區(qū),其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí),能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞(bāo);在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位);在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng),一般在2~4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一(yī)般用電(diàn)泳分析,不(bù)一定要用(yòng)同位素(sù),無放(fàng)射性汙染(rǎn),易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌及(jí)培養細胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液,體腔液,洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛(máo)發(fā),細胞,活PCR技術概論。
