產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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禽腺病毒通用(yòng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Fowl Adenovirus(FAdV)PCR |
YS-P014206 |
分(fēn)類:PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存,避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避光。
有(yǒu)效期:一(yī)年(nián)
貨期(qī):現貨PCR試劑盒(hé)的有效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年(nián),這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部分的試劑一(yī)般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產物檢測部分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結果應(yīng)為陽(yáng)性,有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需在一(yī)次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
2.可(kě)疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本為可疑(yí)樣本;對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次(cì),若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期,則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性;
3. 陰性(xìng):無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染(rǎn),試劑汙(wū)染(rǎn),樣品交叉汙染會出現假陽性結(jié)果;
2. 試劑(jì)運(yùn)輸,保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試劑(jì)配(pèi)製不準確(què)引起的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下(xià)降,可能(néng)會導致出現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
禽(qín)腺病(bìng)毒(dú)通用PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結(jié)合及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反應中模(mó)板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進行(háng),結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā),被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也就能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū),其特異(yì)性程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞(bāo);在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位);在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶,一(yī)次性地將反應(yīng)液(yè)加好後,即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸反(fǎn)應(yīng),一般在2~4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳(yǒng)分析,不(bù)一定要用同位素,無放射性汙染,易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分離(lí)病毒或細菌(jūn)及培養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接用臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液,體腔液,洗嗽(sòu)液(yè),毛(máo)發,細胞,活(huó)PCR技術(shù)概論。
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