產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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禽(qín)腺病(bìng)毒型(xíng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Fowl Adenovirus(FAdVA)APCR |
YS-P014207 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的有效(xiào)期一般為1年，這是指在(zài)適當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核一(yī)次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī)，則(zé)判定為陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測效能下降(jiàng)，可能會導致出(chū)現假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
禽腺病毒(dú)型PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合(hé)及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結合(復性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高的(dí)正確度。再通過選擇(zé)特異性和保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因區，其特(tè)異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞；在病毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成單位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後，即在(zài)DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般(bān)用電泳(yǒng)分析，不一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純度要求低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離病毒或(huò)細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用臨床標本(běn)如血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
