產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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絲狀(zhuàng)網尾綫蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Dictyocaulus filariaPCR |
YS-P014097 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期：一(yī)年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的有效期(qī)一般(bān)為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增部分的試(shì)劑一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽性，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑樣本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則判定為陽性(xìng)，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效(xiào)能下(xià)降，可能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性。
絲狀網尾綫(xiàn)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確結合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成(chéng)單位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地將反應液加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一定要用(yòng)同位素，無(wú)放射性汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度要求低
不(bù)需(xū)要(yào)分離病毒(dú)或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總RNA均可作為擴增模(mó)板。可直接(jiē)用臨床標本如血液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
