產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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人(rén)免疫(yì)缺陷病(bìng)毒(dú)型群PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Human Immunodeficiency Virus 1(HIV1M)1MRTPCR |
YS-P014306 |
分類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條件:-20℃避(bì)光保存,避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避(bì)光。
有效期:一年(nián)
貨期:現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一般為(wéi)1年(nián),這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為陽(yáng)性,有明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī),Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本為可疑(yí)樣本;對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次(cì),若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),則判(pàn)定(dìng)為陽性,否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性;
3. 陰性(xìng):無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染,試劑汙(wū)染,樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果;
2. 試劑(jì)運輸,保存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能(néng)下(xià)降,可能(néng)會導致出現假陰性結(jié)果。
②鹼基配對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實性;
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
人免疫缺(quē)陷病毒(dú)型群(qún)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引(yǐn)物與模板的正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的(dí)結合及引物鏈的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性,使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度下進行,結合(hé)的(dí)特(tè)異性大(dà)大增加(jiā),被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的正確度(dù)。再通過選擇特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區,其特異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加(jiā)的,能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶細胞;在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位);在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後,即在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反應,一(yī)般在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析,不一定(dìng)要(yào)用同位素(sù),無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn),易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細胞,DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直接用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔液,洗嗽(sòu)液,毛發,細胞,活(huó)PCR技術概(gài)論。
