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PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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人免疫(yì)缺陷(xiàn)病(bìng)毒(dú)型(xíng)通(tōng)用PCR檢測試劑盒 |
Human Immunodeficiency Virus 1(HIV1)IRTPCR |
YS-P014305 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為1年，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛好超過正常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果(guǒ)應為陽性，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實(shí)驗視為無效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存不當或試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
人免(miǎn)疫缺陷病(bìng)毒型通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可以在(zài)較高的(dí)溫度下進(jìn)行，結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再通過選擇(zé)特異性和保守性高的(dí)靶基因區，其特異(yì)性程度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在(zài)病毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應。擴(kuò)增產物一般(bān)用電泳分(fēn)析(xī)，不一(yī)定要用同位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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