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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨(huò)號 |
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大(dà)豆S/SS PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P014986 |
儲存(cún)條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保存,避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū):低溫(wēn),避光。
有效(xiào)期(qī):一年
貨期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般為(wéi)1年(nián),這是指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下,產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍(dòng)融(róng)。

u 閾值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好超過正常陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽(yáng)性,有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct值應小於等(děng)於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣本;對於(yú)可疑樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一(yī)次,若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期,則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng),否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰性:無(wú)指數擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染,試(shì)劑汙(wū)染,樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽性結果;
2. 試(shì)劑運輸,保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降,可能會導致(zhì)出現假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。

②鹼基配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的忠實性;
④靶基因的(dí)特異性(xìng)與保守(shǒu)性。
大豆S/SS PCR檢測試劑(jì)盒其中引物與模板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模板的(dí)結合及引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原則的。聚(jù)合酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性,使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結合(復性)可以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行,結(jié)合的特(tè)異性大(dà)大增加,被擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度。再通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因區(qū),其(qí)特(tè)異(yì)性程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的,能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測模(mó)板擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞;在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位);在細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應液加(jiā)好後,即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng),一般在(zài)2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳分(fēn)析,不一(yī)定要用(yòng)同位素(sù),無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染,易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要(yào)求低
不需(xū)要分離(lí)病毒或細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液,體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗嗽液,毛(máo)發,細胞(bāo),活PCR技術概論。
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