產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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馬冠狀(zhuàng)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Equine Coronavirus(ECoV)RTPCR |
YS-P014163 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試劑一般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定在剛好超過正常(cháng)陰性(xìng)質控品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否則該次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本(běn)；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本建議復核(hé)一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否則判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢測效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性與保守性(xìng)。
馬冠狀(zhuàng)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的(dí)正確結合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合(hé)及引物(wù)鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配對原則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可(kě)以在較高的溫(wēn)度下(xià)進行，結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生成量是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一個靶細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地將反(fǎn)應液加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應，一般在2～4 小時完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不(bù)一定要(yào)用同位(wèi)素，無放射(shè)性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要分離病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板。可直接用臨床標本如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
