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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
同(tóng)馬皰疹病(bìng)毒(dú)型(xíng)馬交媾(gòu)疹病(bìng)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號 |
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同(tóng)馬(mǎ)皰疹病(bìng)毒(dú)型(xíng)馬(mǎ)交媾疹病病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Equine Coital Exanthema Virus(3)PCR |
YS-P014162 |
分類:PCR檢測試(shì)劑盒
儲存(cún)條件:-20℃避(bì)光保存(cún),避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避光。
有效期:一年
貨(huò)期:現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效期一(yī)般為1年(nián),這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增部分的試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質控品的檢測結果應(yīng)為陽(yáng)性,有明顯的指數擴(kuò)增期,Ct值(zhí)應小於(yú)等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則(zé)該次實驗視(shì)為無效(xiào)。
2.可疑:有明顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本(běn)為(wéi)可疑樣本;對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì),若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期,則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng),否(fǒu)則(zé)判定為陰(yīn)性;
3. 陰性:無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙染,試劑(jì)汙染(rǎn),樣(yàng)品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ);
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū),保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起的試劑(jì)檢測效(xiào)能下(xià)降(jiàng),可能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性;
④靶基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與保守性(xìng)。
同馬(mǎ)皰疹病(bìng)毒(dú)型(xíng)馬交媾疹病病毒(dú)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的正確結合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng),使反(fǎn)應中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫度下進(jìn)行(háng),結合的(dí)特異性大大增(zēng)加,被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持很高的正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守性高的靶基因(yīn)區(qū),其特異性程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí),能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細(xì)胞;在病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng),PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位(wèi));在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶,一次(cì)性地(dì)將反應液(yè)加好後(hòu),即(jí)在DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng),一般(bān)在2~4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析(xī),不一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素(sù),無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染,易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離病毒或細菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本如(rú)血液,體腔液(yè),洗嗽(sòu)液,毛(máo)發(fā),細胞,活PCR技術概論(lùn)。
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