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PCR檢測試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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禽(qín)結(jié)核分枝杆菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Mycobacterium avianPCR |
YS-P014447 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存，避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測部(bù)分(fēn)試劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結果應為陽性，有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣本建議復(fù)核(hé)一(yī)次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製不(bù)準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
禽(qín)結(jié)核分枝(zhī)杆(gān)菌(jūn)PCR檢測試劑盒其(qí)中引物(wù)與模板的正(zhèng)確(què)結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合(hé)及引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基配對原則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反應中模(mó)板與引物的結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行，結(jié)合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大增加，被擴(kuò)增的(dí)靶基因片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特(tè)異性和保守性高(gāo)的(dí)靶基因區，其(qí)特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加(jiā)的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液加好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋上進行變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純度要求低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如血液，體腔(qiāng)液，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論。
