產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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庫(kù)皮科斯病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Cupixi virus(CPXV)RTPCR |
YS-P014077 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期一般為1年，這是指(zhǐ)在適當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分(fēn)試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求需在一次實(shí)驗中同時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染會出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或試劑配(pèi)製不準確引起的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守性。
庫皮(pí)科斯病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確結合是關鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對原則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng)，使反應中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫(wēn)度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶基因區(qū)，其(qí)特異性程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時完成擴增反應。擴增(zēng)產物(wù)一般用電泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位素，無(wú)放射性(xìng)汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要分離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標本如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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