產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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庫(kù)蠓通用(yòng)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Culicoides spp.PCR |
YS-P014076 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融。
運輸：低溫，避光。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這是指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一次實驗中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染，試劑汙染，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致出(chū)現假陰性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
庫蠓通用PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合(hé)是關鍵。引物(wù)與模板的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(復性)可以在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結(jié)合的特異性大大增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因(yīn)區，其特異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中檢出一(yī)個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴鍋(guō)上進行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用臨床標本(běn)如血液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概論。
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