產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
|
庫蚊(wén)通用(yòng)PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Culex spp.PCR |
YS-P014075 |
分類：PCR檢測試(shì)劑盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為1年，這是指在適(shì)當的儲存溫(wēn)度下。核酸擴增部(bù)分(fēn)的試劑一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一次實驗中同時(shí)滿足，否則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑樣本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次(cì)，若復核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交叉汙染會出現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當或試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降，可能會(huì)導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性(xìng)。
庫蚊(wén)通(tōng)用PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性，使反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度下進行，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大增加(jiā)，被擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因(yīn)區，其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一般(bān)用電泳分析，不(bù)一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要(yào)求低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨床標本如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
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