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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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卵形瘧原(yuán)蟲PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Plasmodium ovalePCR |
YS-P014598 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指在適當的儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增部分的(dí)試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫設定(dìng)在剛好超過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，Ct值應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑(yí)樣本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降，可能(néng)會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性與保守性(xìng)。
卵(luǎn)形(xíng)瘧(nüè)原蟲PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物與模板的正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段也就能保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性和保守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其特(tè)異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好後，即(jí)在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變性-退火-延伸(shēn)反應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳分析，不一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純度要求(qiú)低
不需要分離病毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標本如血液(yè)，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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