產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
|
瘧(nüè)原蟲(chóng)通(tōng)用PCR檢測試劑盒 |
Plasmodium spp.PCR |
YS-P014599 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一(yī)般為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存溫度(dù)下。核酸(suān)擴增部分的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑樣本；對(duì)於可疑(yí)樣本建議(yì)復核(hé)一次，若復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可(kě)能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守性。
瘧(nüè)原蟲(chóng)通用(yòng)PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確(què)結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結(jié)合及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段也就能保持(chí)很高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異性程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模板(bǎn)擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用電泳分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床標本(běn)如血液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
