產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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克(kè)雷伯(bó)菌通用PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Klebsiella spp.PCR |
YS-P014349 |
分(fēn)類:PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸:低溫(wēn),避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期:一年
貨期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一般為(wéi)1年,這是指在適當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸擴增部分的試劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍融(róng)。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將閾值綫設定在剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng),有明顯的指數(shù)擴增期,Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在(zài)一次實驗中(zhōng)同時滿足,否則該次實驗(yàn)視為無(wú)效。
2.可(kě)疑(yí):有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次(cì),若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),則判(pàn)定(dìng)為陽性,否則判定為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰性:無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染,試(shì)劑(jì)汙染(rǎn),樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準確(què)引起的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降,可能(néng)會導(dǎo)致出現假陰(yīn)性結果。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
克雷(léi)伯(bó)菌通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中(zhōng)引物與模板的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵。引物與模板(bǎn)的結合(hé)及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使(shǐ)反(fǎn)應中模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可以在較高的溫(wēn)度(dù)下進行(háng),結合(hé)的特異(yì)性大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā),被擴(kuò)增的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段也就能保持很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通過選擇特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū),其特(tè)異性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量是以指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的,能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo);在(zài)病毒(dú)的檢測中,PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位(wèi));在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶,一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好後(hòu),即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應,一般在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī),不(bù)一定要(yào)用同位(wèi)素,無放(fàng)射性(xìng)汙染,易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度(dù)要求低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床標本(běn)如血液(yè),體腔液(yè),洗嗽液,毛發,細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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