產品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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金氏金(jīn)氏(shì)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Kingella kingaePCR |
YS-P014348 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫，避光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢測部(bù)分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的檢測結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期，Ct值應小於等(děng)於35；
3. 以上要求需在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則該次實(shí)驗視為無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣本；對於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次(cì)，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指數擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品交叉汙染會(huì)出現假陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當或試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確(què)引起的試劑檢測效能下降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假陰性(xìng)結果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
金氏金氏菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的結合(hé)及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則的(dí)。聚合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下進行(háng)，結合(hé)的特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段也就(jiù)能保持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成單位)；在(zài)細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分析，不一定要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無放射性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模板。可(kě)直(zhí)接用臨床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論。
