產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒
| 產品(pǐn)名稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
|
新(xīn)港沙門氏(shì)菌PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
Salmonella newportPCR |
YS-P014713 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn):-20℃避光保(bǎo)存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫,避光。
有效期:一年
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期一般為(wéi)1年,這(zhè)是指在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定:將閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng),有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期,Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足,否則該(gāi)次實驗(yàn)視為無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明顯的(dí)指數擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本;對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建議復核一次(cì),若復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期,則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則判定為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指數擴增期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境汙染,試(shì)劑汙染,樣品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出現假陽性結果(guǒ);
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存(cún)不當或試(shì)劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效能下(xià)降,可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現假陰性結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基配對原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
新港沙(shā)門(mén)氏(shì)菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合(hé)是關鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引物鏈的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性(xìng),使反(fǎn)應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng),結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加,被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段也(yě)就能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū),其特(tè)異性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細(xì)胞;在(zài)病毒的(dí)檢測中(zhōng),PCR的靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi));在(zài)細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次(cì)性地將反應液加(jiā)好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng),一般在2~4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位素,無放射性(xìng)汙染,易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不需(xū)要分離病毒或細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作為擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液,洗嗽(sòu)液,毛(máo)發(fā),細(xì)胞(bāo),活PCR技(jì)術概論。
