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PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號 |
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豬(zhū)鏈(liàn)球菌(jūn)Ⅱ型PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015341 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指在適當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴增曲(qū)綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以上要求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣本；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復(fù)核一次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出現假陰性結果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與保守性。
豬鏈(liàn)球菌Ⅱ型PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與模板的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合的(dí)特異性大(dà)大增加，被擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片段也就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成(chéng)量是以指數(shù)方(fāng)式(shì)增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢出一個靶細胞；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同(tóng)位素，無放射性汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分離病毒或(huò)細(xì)菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
