產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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人葡(pú)萄(táo)球菌PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Staphylococcus hominisPCR |
YS-P014770 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復凍融(róng)。
運輸：低溫，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存溫度(dù)下。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的試劑一般要貯存於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以上要求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗中同時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實驗視為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核一(yī)次，若復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性，否(fǒu)則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試(shì)劑配製不準確(què)引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
人葡萄球菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合及引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復性)可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的(dí)靶基因(yīn)片段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的正確度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性和保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是以指數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進行變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放射性汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術概論。
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