產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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乙型副傷(shāng)寒沙(shā)門氏(shì)菌PCR檢測試劑盒 |
Salmonella paratyphi BPCR |
YS-P014714 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效期(qī)一(yī)般為1年，這是(shì)指在適(shì)當的儲存溫度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑一般要貯存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結果應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上要求需在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則該(gāi)次實驗視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣本；對於(yú)可疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢測(cè)效能下降(jiàng)，可(kě)能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
乙型副傷寒沙門氏(shì)菌PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對原則的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性，使反應中模(mó)板與引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度下進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性大大(dà)增加(jiā)，被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很高的(dí)正確(què)度。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異(yì)性程度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增(zēng)反應。擴增產物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用同位素，無放射性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
