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PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
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丙型副(fù)傷(shāng)寒沙門(mén)氏菌PCR檢測試劑盒(hé) |
Salmonella paratyphi CPCR |
YS-P014715 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一(yī)年(nián)
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常陰性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需在(zài)一次實驗中同時滿足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣本；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導致(zhì)出(chū)現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基因的特(tè)異性(xìng)與保守性。
丙型副傷寒沙(shā)門氏菌PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物與模(mó)板的正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則(zé)的。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫度下進(jìn)行，結合的特異(yì)性(xìng)大大增加，被擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很高的正確(què)度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量(liáng)是以指數(shù)方式增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細胞中檢出一個(gè)靶細胞；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性-退(tuì)火-延伸反應，一般在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位素(sù)，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
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