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PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號 |
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毛(máo)黴屬(shǔ)通(tōng)用PCR檢測(cè)試劑盒 |
Mucor spp.PCR |
YS-P014440 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期(qī)一(yī)般為1年，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢測部分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽性，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該次實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核一(yī)次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判定為陽性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣品交叉汙染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準確(què)引起的試(shì)劑檢測效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導致出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特異性與保守性。
毛黴(méi)屬通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確(què)結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原則的(dí)。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物的結合(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保持(chí)很高的正確度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性和保守性高(gāo)的靶基因區，其特(tè)異性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要(yào)求低
不需要分離病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模(mó)板。可直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
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