產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
|
鼠(shǔ)痘病毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Mouse Pox Virus(MPV)PCR |
YS-P014439 |
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期一般為1年(nián)，這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的儲存溫度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一般要貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好超過正常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測結果(guǒ)應為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需(xū)在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足，否則(zé)該(gāi)次實驗視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增期，則判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不當(dāng)或(huò)試劑(jì)配製(zhì)不準確引起的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能下降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
鼠(shǔ)痘(dòu)病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確結合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應中模板與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的溫度下進(jìn)行(háng)，結合的特異性大(dà)大增加，被擴增的(dí)靶基因片段也就能保持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守性高的靶基因區，其特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式增加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢出一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電泳分析，不一定要用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
