產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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小(xiǎo)鼠乳(rǔ)腺瘤(liú)病毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Mouse Mammary Tumor Virus(MMTV)RTPCR |
YS-P014438 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分析條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一(yī)次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否則該次實驗視(shì)為無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣本；對於(yú)可疑(yí)樣本建(jiàn)議復核一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當或試劑配(pèi)製不準確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
小鼠乳腺(xiàn)瘤病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引物與模板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸是(shì)遵循鹼基配對原則(zé)的(dí)。聚合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與引(yǐn)物的結合(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合的(dí)特異性大大增加，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就能保持很高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個細(xì)胞中檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電泳分析(xī)，不一定要(yào)用同(tóng)位素，無放射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不需要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
