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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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人β--半乳(rǔ)糖苷酶基(jī)因PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015198 |
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分(fēn)試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以上要(yào)求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑(yí)樣本(běn)建議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效能下(xià)降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性；
④靶基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
人β--半(bàn)乳(rǔ)糖苷(gān)酶基(jī)因PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結(jié)合及引物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反應中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可以在(zài)較高的溫度下進行，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因(yīn)片(piàn)段也就能保持很高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再通過選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守性高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素，無放射(shè)性汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要分離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床標本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
