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PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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本迪布焦(jiāo)型(xíng)埃(āi)博(bó)拉(lā)病(bìng)毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒 |
Bundibugyo Ebola Virus PCR |
YS-P013963 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的儲存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的試劑一般要貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性(xìng)，有明顯的(dí)指數擴增期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中同時滿足(zú)，否則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可疑樣本建議復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環境汙染，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不當或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能下降，可能會導(dǎo)致出現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與保守性(xìng)。
本(běn)迪布焦型(xíng)埃(āi)博(bó)拉病毒PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原則的。聚(jù)合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性，使反應中模板與(yǔ)引物的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較高的溫度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大大增(zēng)加，被(bèi)擴增的(dí)靶基(jī)因片段也就能保持很高的正確度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測中，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低
不需(xū)要分離病毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用臨(lín)床標本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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