產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
青(qīng)蟹雙(shuāng)順反子病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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青蟹(xiè)雙順反子(zǐ)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Mud Crab Dicistrovirus (MCDV)PCR |
YS-P014441 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期一(yī)般為1年，這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣本建議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當(dāng)或試劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會導致出(chū)現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與保守性。
青(qīng)蟹雙順反(fǎn)子病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可以在(zài)較高的溫度下進行(háng)，結合的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基因區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的生成量是(shì)以指數(shù)方式增加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細胞；在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學(xué)中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定要用同位素，無(wú)放射(shè)性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不需要分離(lí)病毒或細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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