產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號 |
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雪腐鐮(lián)刀(dāo)菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒 |
Fusarium nivalePCR |
YS-P014216 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這是(shì)指在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設定(dìng)在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú)，否則該次實驗視為無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期(qī)，則判定為陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或試劑配製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測效能下降，可(kě)能會導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異性(xìng)與保守性。
雪腐(fǔ)鐮刀(dāo)菌(jūn)PCR檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板的正確(què)結合是(shì)關鍵。引物與模(mó)板的(dí)結(jié)合及引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)的。聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫度(dù)下(xià)進行，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通過選擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指數方(fāng)式增(zēng)加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反應液加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應，一般在2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴增產(chǎn)物一般(bān)用電泳分析，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及培養細胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
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