產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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布氏岡(gāng)比亞錐(zhuī)蟲 |
Trypanosoma brucei gambiense |
YS-P014882 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒的有效期一(yī)般為1年(nián)，這是指在適當的儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部(bù)分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融。
【結(jié)果分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上要求需在(zài)一次實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑樣本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議復核一次(cì)，若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期，則判定為陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存不當或(huò)試劑配製(zhì)不準確(què)引起的(dí)試劑檢測效(xiào)能下降，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
布氏(shì)岡(gāng)比亞錐(zhuī)蟲其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是(shì)關鍵。引物與模板的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對原則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與引物的(dí)結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增加，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一個靶細胞(bāo)；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退(tuì)火-延伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要(yào)求低
不需要分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增模(mó)板。可直接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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