產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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布(bù)氏布(bù)氏錐(zhuī)蟲PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Trypanosoma brucei bruceiPCR |
YS-P014881 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效期：一(yī)年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸(suān)擴增部分的試劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分試劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的最高點。
【質控標準】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次實驗中同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製不準確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效(xiào)能下降，可(kě)能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保守(shǒu)性。
布氏布氏錐蟲PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板(bǎn)的正確結合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與引物的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度下(xià)進行，結(jié)合的特異(yì)性大大(dà)增加，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持很高的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇特異性和保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是(shì)以指數方式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中檢出一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴(yù)鍋上進行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床標本(běn)如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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