產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
病毒性(xìng)神經壞(huài)死病病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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病毒性神(shén)經(jīng)壞死(sǐ)病(bìng)病毒PCR檢測試劑(jì)盒 |
Viral Nervous Necrosis Virus(VNNV)RTPCR |
YS-P014915 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒(hé)的有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這是指在適當的儲存溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部分的試劑一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測結果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核(hé)一次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
病(bìng)毒性(xìng)神經壞(huài)死病(bìng)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其中引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的結合及引物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引物(wù)的結合(復性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度下進(jìn)行，結(jié)合的特異(yì)性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇特(tè)異性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以(yǐ)指數方式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液加好後，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定(dìng)要用同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要(yào)分(fēn)離病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用臨床標本如(rú)血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
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