產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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田(tián)鼠痘(dòu)病(bìng)毒PCR檢測試劑盒(hé) |
Volepox virusPCR |
YS-P014916 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分的試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應小於等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一(yī)次(cì)實(shí)驗中同時滿足(zú)，否則該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核一次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判(pàn)定為陽性，否則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降，可能(néng)會(huì)導致出(chū)現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性。
田(tián)鼠痘(dòu)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中引物(wù)與模板的(dí)正確結合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原則(zé)的。聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很高的(dí)正確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測(cè)模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性地將反應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延(yán)伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無放射性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求低(dī)
不需要(yào)分離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本如血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論。
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