產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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綿羊星(xīng)狀病(bìng)毒通用PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Ovine Astrovirus （OAstV）RTPCR |
YS-P014545 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的有效期一般為(wéi)1年，這是指在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部分(fēn)的試劑一般要貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定在剛(gāng)好超過正常(cháng)陰性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結果應為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時滿足，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可疑樣本建議復核(hé)一(yī)次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試劑汙染，樣品交叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
綿(mián)羊(yáng)星(xīng)狀(zhuàng)病(bìng)毒(dú)通用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正確結合是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及引物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特(tè)異性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的正確度。再(zài)通過(guò)選擇特(tè)異性和保守性高的(dí)靶基因區(qū)，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方式增加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進行變性-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要求低
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接用臨(lín)床標本如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概論。
