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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Fusarium moniliformeVPCR |
YS-P014215 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效期(qī)：一年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一般為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分的(dí)試劑一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同時滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實(shí)驗視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判定為陽性(xìng)，否則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存不當或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可(kě)能會導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配對原則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合成反應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使反應中模(mó)板(bǎn)與引物的結合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的溫度下(xià)進行，結(jié)合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇特(tè)異性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位)；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增(zēng)反應。擴增產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或(huò)細菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論。
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