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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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白水河病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Whitewater Arroyo virus(WWAV)RTPCR |
YS-P014922 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期：現貨PCR試劑盒的有效期一(yī)般為1年，這是指在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一(yī)次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保守性。
白水河病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與引物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結合的特異(yì)性大大增加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區，其特(tè)異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞；在病毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
