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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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同狷(juàn)羚皰疹病毒(dú)型(xíng)牛羚關聯惡性(xìng)卡他(tā)熱病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Wildebeestassociated Malignant Catarrhal Fever Virus (WAMCF，1)PCR |
YS-P014923 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免反復凍融。
運輸：低溫，避光。
有效期：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一(yī)般為(wéi)1年，這是指在適當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結果分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測結果(guǒ)應為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求需在(zài)一(yī)次實驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可疑(yí)樣本建議(yì)復核一次(cì)，若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則(zé)判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效能下降，可能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
同狷羚皰疹(zhěn)病毒(dú)型(xíng)牛(niú)羚(líng)關聯(lián)惡性(xìng)卡(qiǎ)他熱病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度下進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異性大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基(jī)因片段(duàn)也就能保(bǎo)持(chí)很高的正確度(dù)。再通過選擇(zé)特異性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中檢出一個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上進行變性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要(yào)求低(dī)
不需要分離(lí)病(bìng)毒或細菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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