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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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漢坦病毒通(tōng)用PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Hantanvirus(HTV)RTPCR |
YS-P014262 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年，這是(shì)指在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽性，有明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導致出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特異性與保守(shǒu)性。
漢坦病(bìng)毒通用(yòng)PCR檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配對(duì)原則的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模(mó)板與引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較高的(dí)溫(wēn)度下進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基因片段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高的正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保守性高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區，其特異性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方式增加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增液和水浴鍋(guō)上進行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產物(wù)一般用(yòng)電泳分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模(mó)板。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論。
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