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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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金黃地(dì)鼠白血病(bìng)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Hamster Leukemia VirusRTPCR |
YS-P014261 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般為1年，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試劑一般要貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分(fēn)試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的(dí)檢測(cè)結果應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實驗中同時(shí)滿足，否則(zé)該(gāi)次實(shí)驗視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判定為陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引起的試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異(yì)性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與保守(shǒu)性。
金黃地(dì)鼠白血病(bìng)病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正確結合是關鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(復性(xìng))可以在較(jiào)高的(dí)溫度(dù)下進行，結合(hé)的(dí)特(tè)異性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也就能(néng)保持很高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶基因區，其特(tè)異(yì)性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶細胞；在病毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地將(jiāng)反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增反應(yīng)。擴增產物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定要用同位素，無放射(shè)性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概論(lùn)。
