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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)

禽皰疹(zhěn)病(bìng)毒型(xíng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)

文(wén)字(zì):[大][中][小] 2024-3-14    瀏(liú)覽次(cì)數:726    
商(shāng)品屬性
產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) 英(yīng)文名稱 貨號
禽(qín)皰疹病毒型PCR檢測試劑盒
Gallid Herpesvirus 11PCR
YS-P014225
規格:50T
分(fēn)類:PCR檢測試劑盒
儲存條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸:低溫,避光(guāng)。
有效(xiào)期:一(yī)年(nián)

貨(huò)期:現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期一(yī)般(bān)為1年,這是指在(zài)適當的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一般要貯存(cún)於-20℃下,產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。

【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定】
u 基綫(Baseline)設(shè)定:應(yīng)選擇該次實驗指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)前(qián)所(suǒ)有樣(yàng)本熒光信(xìn)號比較穩(wěn)定的一段(duàn)區(qū)域(所有樣本熒光信(xìn)號無較大(dà)波動(dòng)),起(qǐ)始(shǐ)點(Start)應避(bì)開熒(yíng)光采集起(qǐ)始(shǐ)階段(duàn)的(dí)信號(hào)波動(dòng),終止(zhǐ)點(diǎn)(End)應比最早出現(xiàn)指數擴增的(dí)樣本Ct值減少1~3個循(xún)環(huán),建議基綫設為6~15。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
1.   陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陰性(xìng),無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無(wú)Ct;
2.   陽性(xìng)質控品的檢測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性,有明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī),Ct值應(yīng)小於等(děng)於35;
3.   以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則該次實(shí)驗視(shì)為無效。
【結果判(pàn)斷】
1.   陽性(xìng):有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期,且(qiě)Ct<38;
2.可疑:有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本(běn);對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核一(yī)次(cì),若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期,則(zé)判(pàn)定為陽性,否則(zé)判定為陰性(xìng);
3.   陰性:無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1.   實驗(yàn)室環境汙染(rǎn),試劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ);

2.   試(shì)劑(jì)運輸,保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準確引起(qǐ)的試劑檢測效(xiào)能下降(jiàng),可能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。

PCR反應的(dí)特(tè)異性:
   ①引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)DNA特(tè)異正確(què)的(dí)結合(hé);
   ②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé);
   ③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng);
   ④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
禽(qín)皰疹(zhěn)病毒(dú)型PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反應中模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫度下進(jìn)行,結(jié)合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大增加,被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區,其特(tè)異(yì)性程度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以指數方(fāng)式增加的,能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢出一個靶細胞;在病毒(dú)的檢測(cè)中,PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成單位);在細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便,快速
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶,一(yī)次性地將反應液加(jiā)好後,即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng),一(yī)般在2~4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定要用同位(wèi)素(sù),無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞,DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可作為(wéi)擴增模板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔液(yè),洗嗽(sòu)液(yè),毛發,細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
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