產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號 |
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鴨特定基因(yīn)序(xù)列(liè)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015291 |
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效期：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年，這是指在適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應為陽(yáng)性，有明(míng)顯的指數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對於可疑樣本(běn)建議復(fù)核一(yī)次，若復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測效能下(xià)降，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
鴨(yā)特定(dìng)基因序(xù)列PCR檢測試劑盒 其中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的正確(què)結(jié)合是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原則的(dí)。聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可以在較(jiào)高的(dí)溫度下進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇特(tè)異性和保守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其(qí)特異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方(fāng)式增加的(dí)，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標本如血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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