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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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克(kè)柔(róu)念珠(zhū)菌PCR檢測試劑(jì)盒 |
Candida kruseiPCR |
YS-P013981 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指在適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次實驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一次，若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否則判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品交叉汙染會(huì)出現假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不當或試(shì)劑(jì)配製不準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
克(kè)柔念珠菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚合酶合(hé)成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可以在較高的(dí)溫(wēn)度下進行，結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被(bèi)擴增的(dí)靶基(jī)因片段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶(bǎ)基(jī)因區，其特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的(dí)生成量是以指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測模(mó)板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在細(xì)菌學中zui小檢出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用電泳(yǒng)分析，不(bù)一定要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要(yào)求(qiú)低
不需要分離(lí)病毒或(huò)細菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標本如血(xiě)液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
