產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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藍氏(shì)賈第鞭(biān)毛蟲PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Giardia lambliaPCR |
YS-P014234 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年，這是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分的(dí)試劑一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設定(dìng)在剛好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要求需(xū)在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於可疑(yí)樣本建(jiàn)議復核一次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可能會(huì)導致出現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性(xìng)。
藍(lán)氏賈第鞭毛(máo)蟲PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基配對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較高的(dí)溫度下進行(háng)，結合(hé)的特異性(xìng)大大增加，被(bèi)擴增的靶基(jī)因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分析(xī)，不(bù)一定要用同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要(yào)求低
不(bù)需要分(fēn)離病毒或細菌(jūn)及培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
