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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)

藍(lán)氏賈(gǔ)第(dì)鞭(biān)毛蟲(chóng)型PCR檢測(cè)試劑盒

文(wén)字:[大(dà)][中][小] 2024-3-14    瀏覽次數:632    
商品(pǐn)屬性
產品(pǐn)名稱(chēng) 英(yīng)文(wén)名稱 貨(huò)號(hào)
藍氏(shì)賈(gǔ)第(dì)鞭毛(máo)蟲(chóng)型PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
Giardia lambliaAPCR
YS-P014233
規(guī)格:50T
分(fēn)類:PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存條件:-20℃避(bì)光保存,避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū):低溫,避光(guāng)。
有效期:一(yī)年

貨期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期一般為1年(nián),這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。

【結(jié)果分析(xī)條件設定】
u 基綫(xiàn)(Baseline)設定:應選擇該(gāi)次實驗(yàn)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)前(qián)所有(yǒu)樣(yàng)本(běn)熒光信(xìn)號比(bǐ)較穩定的一段區(qū)域(yù)(所(suǒ)有樣(yàng)本(běn)熒(yíng)光信號無(wú)較(jiào)大波(bō)動),起(qǐ)始點(diǎn)(Start)應避開熒(yíng)光采集起始階(jiē)段(duàn)的(dí)信號波動(dòng),終止點(diǎn)(End)應比最(zuì)早(zǎo)出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本(běn)Ct值(zhí)減(jiǎn)少1~3個循環,建議(yì)基綫設為6~15。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
1.   陰(yīn)性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陰(yīn)性,無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或無(wú)Ct;
2.   陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽(yáng)性,有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),Ct值應小於(yú)等於(yú)35;
3.   以上要(yào)求需(xū)在一(yī)次實驗中同時(shí)滿足,否則(zé)該次實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
1.   陽(yáng)性(xìng):有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,且Ct<38;
2.可(kě)疑:有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本;對於(yú)可疑樣本(běn)建議復(fù)核一次,若復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期,則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng),否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng);
3.   陰性(xìng):無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1.   實驗(yàn)室環境汙染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果;

2.   試劑運輸(shū),保存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製不(bù)準確引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng),可能(néng)會(huì)導致出(chū)現假陰性結果(guǒ)。

PCR反應的特異(yì)性(xìng):
   ①引物與模板(bǎn)DNA特異正確的(dí)結合(hé);
   ②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé);
   ③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠實(shí)性(xìng);
   ④靶基因的特異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
藍(lán)氏賈第鞭(biān)毛蟲(chóng)型(xíng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板的結合(hé)及(jí)引物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性,使反(fǎn)應中(zhōng)模板與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進行(háng),結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加,被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保持很高的正(zhèng)確度。再通過選擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū),其特異性程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以指數方(fāng)式增加的,能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個細胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞;在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位);在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一次性地將(jiāng)反應液(yè)加好後(hòu),即在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應,一般在2~4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī),不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素,無放射(shè)性汙染(rǎn),易推廣。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床標本如(rú)血(xiě)液,體腔(qiāng)液,洗嗽液(yè),毛(máo)發(fā),細胞,活(huó)PCR技術(shù)概論。
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