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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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牛茨城(chéng)病(bìng)病毒PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Ibaraki VirusRTPCR |
YS-P014323 |
分類:PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲存(cún)條件:-20℃避光(guāng)保存(cún),避免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避光。
有效期:一年
貨期:現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年,這是指在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià),產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將閾(yù)值綫設定在剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽性,有明顯的(dí)指數擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35;
3. 以上要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿足,否(fǒu)則該(gāi)次實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
2.可(kě)疑:有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為可疑樣本(běn);對(duì)於可疑(yí)樣本(běn)建議復核一(yī)次(cì),若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期,則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng),否則判定為陰性(xìng);
3. 陰性:無指數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染,試(shì)劑(jì)汙染,樣品交叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果;
2. 試劑運輸(shū),保存(cún)不當或試(shì)劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測(cè)效能下降,可能會導致(zhì)出(chū)現假陰性結果。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異性與保守性(xìng)。
牛茨(cí)城(chéng)病(bìng)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與模板的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的溫(wēn)度下進行,結(jié)合的特異(yì)性大大增加,被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確(què)度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因區,其(qí)特異(yì)性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生成量是(shì)以指數方(fāng)式增(zēng)加的,能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞;在(zài)病(bìng)毒的檢測中,PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單位);在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液(yè)加好後,即在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應,一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用電泳分(fēn)析,不(bù)一(yī)定要(yào)用同位素(sù),無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn),易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不(bù)需要分離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞,DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液,體腔液,洗嗽(sòu)液,毛(máo)發,細(xì)胞,活PCR技術概論。
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