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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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副豬嗜血杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Haemophilus parasuisPCR |
YS-P014257 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則該次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復核一次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否則判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起的試(shì)劑(jì)檢測效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
副(fù)豬嗜(shì)血(xiě)杆(gān)菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模板的正確結(jié)合是關鍵。引物與模板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反應中模板與引物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度下進行，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能保(bǎo)持很高的(dí)正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其特(tè)異(yì)性程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是(shì)以指數(shù)方(fāng)式增加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑(bān)形成單位)；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分析，不一定要(yào)用同位素(sù)，無放射(shè)性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純度要(yào)求低
不需要分(fēn)離病毒或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為擴增模板(bǎn)。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
