產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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幼禽螺杆菌PCR檢測試劑(jì)盒 |
Helicobacter pullorumPCR |
YS-P014273 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指在適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正常陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗中同(tóng)時(shí)滿足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配製不(bù)準確引起的試劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
幼(yòu)禽(qín)螺杆菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結合及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性，使反(fǎn)應中模板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的特異性大大增加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高的正確度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特異性和保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不一定要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射性(xìng)汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求低
不需(xū)要(yào)分離病毒或細(xì)菌及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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