產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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人冠狀(zhuàng)病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Human Coronavirus(HCoV)RTPCR |
YS-P014300 |
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún),避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸:低(dī)溫(wēn),避光。
有效期:一(yī)年(nián)
貨期:現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年,這是指在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下,產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明顯的指數擴增期,Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú),否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
2.可疑:有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑樣本(běn);對於可疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次,若復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期(qī),則判定為陽(yáng)性,否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性;
3. 陰性:無指數擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗室環境汙染,試劑(jì)汙(wū)染(rǎn),樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假陽性結果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降,可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
②鹼基(jī)配對原則;
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實性(xìng);
④靶基因(yīn)的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
人冠狀(zhuàng)病毒通用PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中引物與模(mó)板的正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及引物(wù)鏈的延伸是遵循(xún)鹼基配對原則(zé)的。聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的(dí)溫度(dù)下進行(háng),結(jié)合的特異性大(dà)大增加(jiā),被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保持很高的(dí)正確度。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因區(qū),其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指數(shù)方(fāng)式(shì)增加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞;在病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶,一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應液加好後(hòu),即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反應,一般在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī),不一定要用(yòng)同(tóng)位素(sù),無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn),易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分離病毒或細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo),DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本如血液,體腔液,洗嗽液,毛發,細胞(bāo),活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
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