產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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人鼻(bí)病毒(dú)通(tōng)用(yòng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Human Rhinovirus PCR |
YS-P014315 |
分類:PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn):-20℃避光保存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸:低溫,避(bì)光。
有效期(qī):一年
貨期:現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為1年(nián),這是指在適當的儲存(cún)溫度下。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下,產物檢測(cè)部分試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍融。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾值綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應(yīng)為陽性,有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),Ct值應(yīng)小於等(děng)於(yú)35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足,否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效。
2.可疑(yí):有明顯的(dí)指數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣本為可疑樣本;對於可疑(yí)樣本建議復核一次,若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期,則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng),否則判定為陰性;
3. 陰(yīn)性:無指(zhǐ)數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染,試劑(jì)汙染(rǎn),樣(yàng)品交叉汙染會出現(xiàn)假陽性結果;
2. 試劑(jì)運(yùn)輸,保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降(jiàng),可(kě)能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
②鹼基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
人鼻(bí)病(bìng)毒通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性,使反應中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進行,結合的特異(yì)性大大增(zēng)加,被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段(duàn)也就能(néng)保持很(hěn)高的正確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和保守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區,其(qí)特(tè)異性(xìng)程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測模板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞;在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑形成單(dān)位(wèi));在(zài)細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次性地將(jiāng)反應液(yè)加好後,即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一般在(zài)2~4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產物(wù)一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定要(yào)用同位素,無(wú)放(fàng)射性汙染(rǎn),易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要(yào)分離病毒或(huò)細(xì)菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè),體腔液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛(máo)發,細胞,活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
