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PCR檢測試(shì)劑盒
| 產品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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人鼻病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Human Rhinovirus 9 9 PCR |
YS-P014314 |
分類:PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸:低溫,避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期:一年
貨期:現貨PCR試(shì)劑盒的有效期一般為1年(nián),這是指在(zài)適當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產物檢測(cè)部分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點。
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽性,有明(míng)顯的(dí)指數擴增期,Ct值(zhí)應小於等(děng)於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑(yí):有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本;對(duì)於可疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次,若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期,則判定為(wéi)陽性,否則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指數擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn),試劑汙(wū)染(rǎn),樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會出現假陽性(xìng)結果(guǒ);
2. 試劑運輸,保(bǎo)存不當(dāng)或試(shì)劑配製不準確(què)引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能下降(jiàng),可能會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異性與保守性。
人(rén)鼻(bí)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合是關(guān)鍵。引物與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng),使(shǐ)反應(yīng)中模板與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行,結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大增加,被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也就(jiù)能保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區,其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以指數(shù)方式增(zēng)加的,能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi));在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶,一次性地(dì)將反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu),即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延伸反(fǎn)應,一般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分析,不一定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素(sù),無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn),易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病毒或細菌(jūn)及培養細(xì)胞,DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血液(yè),體腔(qiāng)液,洗嗽液,毛(máo)發,細胞,活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
